水果、蔬菜汁 游离氨基酸含量的测定

中华人民共和国国家标准
水果、蔬菜汁 游离氨基酸含量的测定 GB 12292-90
Juice of fruits and vegetables- Determination of free amino acid

1 主题内容与适用范围 本标准规定了水果、蔬菜汁中游离氨基酸的提取净化及测定方法。
2 测定原理 水果、蔬菜汁通过阳离子交换树脂,固定及净化氨基酸。用2mol/L氢氧化铵把氨基酸 洗脱后,脱氨浓缩。用氨基酸分析仪测定含量。
3 仪器设备
3.1 氨基酸分析仪或高压液相色谱仪；
3.2 玻璃柱,高20cm,内径2cm；
3.3 捣碎机；
3.4 离心机；
3.5 天平；
3.6 旋转蒸发器。
3.7 真空干燥器。
4 试剂 全部试剂均为分析纯,配制试剂均用去离子水。
4.1 阳离子交换树脂,Dowex 50W×4型,100～200目,或其他适宜的树脂。
4.2 盐酸溶液 6mol/L,0.1mol/L。
4.3 氢氧化铵溶液 2mol/L。
4.4 氢氧化钠溶液 3.5mol/L。
4.5 每种氨基酸标准溶液 0.0025M。
4.6 仪器分析用的各种缓冲液。
4.7 仪器分析用的茚三酮试剂。
5 试样选取和制备
5.1 液体产品 需充分混匀。
5.2 固体产品 选取有代表性的水果和蔬菜洗净,擦干,剥去或削去果皮,用四分法取样150g左右。
5.3 称样 称取样品100～150g,准确至0.01g,置于捣碎器的玻璃缸内,加入等量的水。
5.4 样品捣碎 将盛样品的玻璃缸装在捣碎机上,在1档速度捣碎1min,取出倒入烧杯中。
5.5 过滤及离心 把已捣碎的样液过滤,吸取10mL滤液放入离心管中,在4 000r/min的转速下离心15min。
5.6 脱果胶 对含果胶丰富的样液需用乙醇处理,准确吸取样液5mL,加入34mL96％乙醇,过滤,用15mL80％乙醇分三次冲洗滤纸,将滤液在35℃下减压蒸馏。
6 分析步骤
6.1 固定柱的装置 将Dowex 50W×4树脂装入玻璃圆柱中,离上端空出约10cm,用6mol/L盐酸250mL活化树脂,然后用水洗至无氯离子为止（用硝酸银检查,不产生白色沉淀）。调节活塞,使溶液流速为1mL/min。
6.2 固定及洗脱 吸取5mL样液或液体产品,除果胶物的样液则取全部,置玻璃圆柱中,再加5mL水,待液体通过树脂后再加2mol/L氢氧化铵50mL,可分3～4次加完,用50mL水洗涤,将加2mol/L氢氧化铵流出的溶液收集在圆底烧瓶内,在减压真空和加热(40～45℃)条件下蒸发至干,用5mL0.1mol/L盐酸溶解。
6.3 脱氨 吸取待测液1mL,加入3.5mol/L氢氧化钠溶液2～3滴,调至pH10～11,放在真空干燥器中减压蒸干。用1mL水洗涤,再抽真空蒸干。这样重复2次,加入pH2.2缓冲液0.5mL和0.1mol/L盐酸0.5mL,使pH达到2.2,再稀释5～10倍后测定。
6.4 测定 用氨基酸分析仪测定氨基酸含量,测定前需做2～3个氨基酸标样,待仪器稳定后再测试样。
7 结果计算
7.1 结果表示 用mg/kg或mg/L。
7.2 计算公式
　　　　　　　　　　　　NG
某个氨基酸含量(mg/kg)＝──×10**(-3)×d
　　　　　　　　　　　　 m
　　　　　　　　　　　　NG
某个氨基酸含量(mg/L)＝──×10**(-3)×d
　　　　　　　　　　　 mL
式中：NG--从仪器测得的某个氨基酸的质量,Ng； m--新鲜样品重,g； mL--原始取样体积,mL； d--稀释倍数。
7.3 允许差 水果、蔬菜汁游离氨基酸平行测定的结果,相对相差不得大于5％。

附加说明：
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由中国农业科学院分析测试中心负责起草。
本标准由上海农科院分析中心参加起草。
本标准主要起草人李伟格、顾金炎、陈必芳。
本标准参照采用NFV 76--115 1983《水果蔬菜汁中游离氨基酸的测定》。

国家技术监督局1990-03-29批准 1990-12-01实施

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